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熒光染料的檢測及光學濾光片的選型


熒光染料的檢測及光學濾光片的選型

熒光染料能夠吸收特定波長區域的能量,然后在其他特定波長區域內重新發射該能量。一般來說,熒光染料會被高頻率的照明(紫外UV、紫色或藍色光譜區域內的波長)激發或吸收能量,然后會在頻率較低的照明(綠色、紅色或近紅外光譜區域內的波長)中發射該能量。每種熒光染料都具備了能夠高效吸收能量的波長,又稱為峰值激發波長λ (nm),以及能夠將所吸收到的最多能量重新發射的對應波長,又稱為峰值發射波長λ (nm)。選擇單獨光學濾光片以及最大透射的波長將能夠確保您獲得清晰度最高的圖像。

濾光片一:激發濾光片
激發濾光片是放置于熒光檢測裝置的照明路徑內。其目的是用于過濾光源中的所有波長,除了受檢測熒光染料的激發能量范圍。濾光片的最小透射(%)是決定圖像亮度和清晰度的關鍵。對于任何激發濾光片,富愛其光電建議使用的最小透射為40%,最理想的透射為>85%。激發濾光片的帶寬應完全出現在熒光團的激發能量范圍內,而最理想的濾光片的中心波長(CWL)應盡可能與受檢測的熒光團的峰值激發波長的長度相近。由于光密度(OD)是決定濾光片如何截止帶寬中波長的衡量標準,因此激發濾光片的光密度是圖像背景暗度的關鍵。建議使用的最小光密度為3.0,最理想的光密度為6.0。具備最理想的中心波長、最小透射(%)以及光密度的光學濾光片能夠提供清晰度最高的圖像,而濾光片的最深截止則能夠確保檢測到最微弱的發射信號。


濾光片二:發射濾光片
發射濾光片是放置于熒光檢測裝置的成像路徑內。其目的是用于過濾受檢測熒光團的整個激發能量范圍,以及透射該熒光團的發射能量范圍。對于發射濾光片,我們所建議的最小透射、帶寬、光密度以及中心波長均與激發濾光片相同。同樣的,具備最理想的中心波長、最小透射(%)以及光密度的發射濾光片能夠提供清晰度最高的圖像,而濾光片的最深截止則能夠確保檢測到最微弱的發射信號。

濾光片三:二向色性濾光片或分光器

富愛其光電濾光片或分光器是以45°角放置于激發濾光片與發射濾光片之間。其目的是用于將激發信號反射至受檢測的熒光染料,然后將發射信號透射至檢測設備。最理想的二向色性濾光片或分光器應能夠在最大反射率和最大透射率之間迅速過渡,激發濾光片帶寬的最理想反射率為>95%,而發射濾光片帶寬的最理想透射率為>90%。選擇濾光片時,應該將熒光的相交波長(λ)考慮在內,以確保獲得最低雜散光和最高信噪比的熒光圖像。

東莞市富愛其光電是專業的光學濾光片供應商,關于熒光染料檢測、熒光二維碼檢測、熒光標識檢測濾光片的選型及應用請與富愛其光電聯系。

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